Long Noncoding RNA High Expression in Hepatocellular Carcinoma Facilitates Tumor Growth Through Enhancer of Zeste Homolog 2 in Humans

日期：2016-04-19 標簽：lncRNA-HEIH,EZH2

lncRNA HEIH與蛋白EZH2互作

文章研究思路

核心Figure

Figure說(shuō)明：Figure主要闡述的是lncRNA HEIH與蛋白EZH2的相互作用。A：RIP實(shí)驗。利用EZH2抗體，在Huh-7細胞和HCCLM3細胞中，釣取與蛋白EZH2結合的lncRNA，qPCR檢測，結果證實(shí)蛋白EZH2與lncRNA HEIH有相互作用（Ab-1和Ab-2為lncRNA HEIA的兩個(gè)檢測位點(diǎn)）。B：將A圖結果數據化。 C：利用RIP實(shí)驗驗證蛋白actin和AK055007與lncRNA HEIA無(wú)相互作用，作為A圖對照。D：作為A圖的反向驗證，用RNA pull down驗證lncRNA HEIH與蛋白EZH2有相互作用。E：利用RNA pull down進(jìn)一步驗證蛋白EZH2與 lncRNA HEIH結合區域。

我們公司可以提供的技術(shù)服務(wù)

一、RIP

RIP(RNA 免疫共沉淀)技術(shù)，主要--研究蛋白與RNA的相互作用，主要原理是利用特定的蛋白抗體，在全蛋白提取液中捕獲特定蛋白，特定蛋白含有與之結合的RNA，洗脫RNA，反轉錄，qPCR檢測。我公司在實(shí)驗體系中設置陽(yáng)性及陰性對照，進(jìn)一步排除系統誤差。

二、RNA pull down

RNA pull down技術(shù)，主要研究lncRNA與蛋白的相互作用，主要原理是體外轉錄生物素標記的RNA，標記有生物素的RNA吸附到鏈霉親和磁珠上，RNA與全蛋白提取液孵育，捕獲互作的蛋白，后續進(jìn)行銀染-質(zhì)譜或Western檢測。我公司在實(shí)驗體系中同時(shí)提供lncRNA正義鏈與反義鏈的pull down。

三、預測lncRNA與蛋白互作位點(diǎn)

通過(guò)相關(guān)的預測軟件預測lncRNA的結合位點(diǎn)，根據結合位點(diǎn)設計實(shí)驗方案，利用RNA pull down實(shí)驗，進(jìn)一步驗證蛋白與lncRNA的結合區域。

      原文鏈接：Long Noncoding RNA High Expression in Hepatocellular Carcinoma Facilitates Tumor Growth Through Enhancer of Zeste Homolog 2 in Humans （提取碼：21b3）

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