The lncRNA H19 promotes epithelial to mesenchymal transition by functioning as miRNA sponges in colorectal cancer

日期：2016-09-01 標簽：H19,miR138,miR200a

The lncRNA H19 promotes epithelial to mesenchymal transition by functioning as miRNA sponges in colorectal cancer

在結腸癌細胞中lncRNA H19作為miRNA的海綿體促進(jìn)EMT進(jìn)程

（IF=5.0）

文章思路：

H19作為miR-138、miR-200a的海綿吸附體，即ceRNA(內源性競爭RNA)，通過(guò)調節miR-138、miR-200a，來(lái)調節Vimentin、ZEB1與ZEB2的表達，從而調節EMT進(jìn)程。

核心Figure：

A圖：構建過(guò)表達H19穩轉株（HT29/SW620細胞），B圖：H19過(guò)表達細胞形態(tài)（HT29/SW620細胞），間充質(zhì)細胞更接近于長(cháng)梭形，細胞極性更小，C圖：western檢測EMT過(guò)程中的標志性蛋白，Ecadherin 蛋白表達下降，Vimentin蛋白表達上升。D、E圖：Transwell實(shí)驗，間充質(zhì)細胞具有更強的細胞遷移能力。

A圖：AGO2-RIP，主要用于驗證microRNA與lncRNA互作。B圖：生物信息學(xué)預測miR138與miR200a與 H19的結合位點(diǎn)，C圖：qPCR檢測miR138與miR200a對H19的mRNA的影響，miRNA不會(huì )影響其ceRNA的表達。D圖：luciferase驗證miR138與miR200a與H19的結合活性。

A圖：qPCR檢測miR138對 Vimentin的mRNA表達水平的影響。B圖：western檢測miR138對 Vimentin的蛋白表達水平的影響C圖：luciferase實(shí)驗驗證miR138與Vimentin 編碼區的結合。A、B、C圖miR138對 Vimentin的編碼區結合，并降解Vimentin的mRNA. D圖：qPCR檢測H19過(guò)表達細胞中Vimentin的mRNA表達水平，E圖：western檢測H19過(guò)表達細胞中Vimentin的蛋白表達水平。luciferase實(shí)驗驗證H19過(guò)表達細胞對Vimentin 編碼區的的影響。

本公司可進(jìn)行類(lèi)似實(shí)驗的實(shí)驗設計及整體實(shí)驗外包項目。實(shí)驗項目可包括慢病毒穩轉株的建立（過(guò)表達/敲低），qPCR、western、細胞功能實(shí)驗（Transwell、細胞增殖-CCK8、劃痕、細胞流式-周期/凋亡檢測等）AGO2-RIP、生物信息學(xué)預測、luciferase。（紅色標識為我公司主營(yíng)項目）

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