核質(zhì)分離

核質(zhì)分離是檢測某種RNA或蛋白質(zhì)在細胞質(zhì)和細胞核中含量的一種方法，根據細胞膜和核膜溶解的難易用不同強度的裂解液溶解細胞，達到細胞質(zhì)和細胞核物質(zhì)分離的效果。分離的產(chǎn)物通過(guò)q-pcr或WB分別檢測目的RNA或蛋白在細胞質(zhì)和細胞核中的含量。

核質(zhì)分離質(zhì)控標準：

核質(zhì)分離提取RNA用actin和U6的mRNA作為內參，actin mRNA基本位于細胞質(zhì)中，U6 mRNA基本位于細胞核。分離的RNA產(chǎn)物用actin和U6進(jìn)行q-pcr檢測，確定核質(zhì)分離是否成功。

核質(zhì)分離提取蛋白用Histone和GAPDH作為內參標準，Histone基本位于細胞核內，GAPDH基本位于細胞質(zhì)中。分離提取的蛋白產(chǎn)物分別用Histone和GAPDH抗體進(jìn)行WB檢測核質(zhì)分離分離是否成功。

• 1 . 基因表達調控
  • 1.1. 表觀(guān)遺傳修飾調控
  • 1.2. 轉錄水平調控
  • 1.3. 轉錄后水平調控
• 2 . 基因表達調控實(shí)驗技術(shù)
  • 2.1. CHIP 染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)
  • 2.2. RIP RNA結合蛋白免疫沉淀技術(shù)
  • 2.3. CHIRP 免疫共沉淀實(shí)驗
  • 2.4. CLIP實(shí)驗技術(shù)
  • 2.5. RNA pull-down
  • 2.6. DNA pull-down
  • 2.7. RNA-RNA pull-down
  • 2.8. Luciferase 熒光素酶實(shí)驗
  • 2.9. DNA/RNA EMSA 凝膠電泳遷移實(shí)驗
  • 2.10. FISH 免疫熒光原位雜交技術(shù)
  • 2.11. ?核質(zhì)分離